Подготовка питательной среды для культивирования Bifidobacterium bifidum № 1
Модифицированная среда Блаурока:
Печень крупного рогатого скота (ГОСТ 193421-73) (Печеночный отвар (1:2) - 1 л
Агар микробиологический (ГОСТ 17206-96) - 0,025 кг
Лактоза (ГФУ, 1 вид., Доп. 2, 2008, с. 485) - 0,01 кг
Натрий хлорид (ГФУ, 1 вид., Доп. 1, 2004, с. 422) - 0,005 кг
Пептон сухой для бактериологических целей (ГОСТ13805-76) - 0,01 кг
Цистеин (ГФУ, 1 вид. 2004, с. 483) - 0,0001 кг
Среду для культивирования бифидобактерий готовят в 5 стеклянных бутылях объемом 10л каждый (ГОСТ 24788-81).
Для приготовления среды принимают 1л
печеночного бульона и добавляют к нему 5,0 г хлористого натрия, 10,0 г пептона и 0,75 г расплавленного микробиологического агара, устанавливают рН = 7,0 с помощью раствора гидроокиси натрия и кипятят 15 минут. После часового отстаивания, добавляют 10,0 г лактозы и 0,1 г L-цистин. Среду стерилизуют в автоклаве типа ГПС-560. Режим стерилизации: время - 30 минут, температура - 110?С, давление пара - 0,7 атм. (Регистрируется и регулируется с помощью манометра типа МТП-100). После стерилизации среду передают в аппарат биосинтеза на повторную стерилизацию. После стерилизации среду охлаждают до 38?С путем подачи в рубашку воды для охлаждения. Питательная среда контролируется на стерильность в цеховой лаборатории и периодически осуществляется контроль в ОБТК.
Приготовление компонентов среды высушивания
Приготовление раствора
желатина (на один баллон)
Технологический процесс ведется в помещении XIII "Помещение приготовления сред высушивания" класса чистоты D. 54 г желатина взвешивают на весах и переносят в стеклянный баллон, куда заливают 1000 мл воды для инъекций. Содержимое баллона перемешивают и оставляют набухать при комнатной температуре на 3 часа.
Баллон с набухшим желатином помещают в водяную баню с температурой 50-60°С до полного растворения желатина. Полученный раствор желатина фильтруют через фильтр в стерильный баллон, содержащий 1000 мл воды для инъекций. Содержание баллона перемешивают, закрывают ватно-марлевой пробкой, которую накрывают пергаментом, затем Крафт и фиксируют шпагатом и передают в стерилизатор для стерилизации 2 раза по 100 минут при температуре (132±2)°С и давлении 0,2 МПа. Полученный раствор передают на операцию «Приготовление сахарозо-желатиновой среды»